SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細胞
種屬 | 小鼠 |
年齡(性別) | 7-10周齡 |
組織來源 | 腎小球系膜細胞 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
背景描述 | SV40 MES 13細胞的細胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動蛋白,在細胞質(zhì)中有豐富的平行微絲。有報道稱,在1uM血管緊張素Ⅱ存在下,SV40 MES 13細胞會收縮。SV40 MES 13細胞在軟瓊脂中形成克??;SV40大T抗原陽性。 |
生長培養(yǎng)基 | 71.25% DMEM高糖(貨號:PM150210)+23.75% Ham's F-12(貨號:PM150810)+5% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120) |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?,加6~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項作或者凍存