SUP-B15人Ph+骨髓急性淋巴白血病細(xì)胞

• 細(xì)胞縮寫：    SUP-B15細(xì)胞

      細(xì)胞名稱：    SUP-B15(人Ph+骨髓急性淋巴白血病細(xì)胞)

      詳細(xì)背景：    這株細(xì)胞來源于一位B細(xì)胞全部為費(fèi)城染色體陽性的8歲小孩的骨髓。這些細(xì)胞表達(dá)多個(gè)B細(xì)胞標(biāo)記，但不表達(dá)T細(xì)胞標(biāo)記。β-2 微球蛋白，Leu12，My7 (CD13), OKT9 (CD71), OKT10 (CD38) 及 CALLA (CD10)抗體陽性。CB1, Leu 1 (CD5), Leu2 (CD8), Leu3 (CD4), Leu4 (CD3), Leu5 (CD2), Leu6 (CD1a), Leu9, Leu M1 (CD15), My9 (CD33), 表面抗原 (sIg -) 及 Epstein-Barr 病毒陰性。

      細(xì)胞來源：    細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系

      "購買細(xì)胞注意事項(xiàng)：

  1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

  2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。

  3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

  4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。"    P4

      包裝規(guī)格：    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

      細(xì)胞規(guī)格：    1*10(5)/ml——1*10（6）/ml

      安全水平：    1

      細(xì)胞種屬：    人

      組織來源：    骨髓；急性淋巴母細(xì)胞白血病；B淋巴母細(xì)胞

      細(xì)胞形態(tài)：    淋巴母細(xì)胞樣

      細(xì)胞特性：    懸浮

      細(xì)胞融合度：    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

      細(xì)胞檢測：    細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

• SUP-B15人Ph+骨髓急性淋巴白血病細(xì)胞

貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基，第二天再進(jìn)行消化處理
2.如果細(xì)胞收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基，培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加適量0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間）
2.鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让?，加6~8ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)作或者凍存