NR8383大鼠肺泡巨噬細胞
培養(yǎng)條件:89%基礎培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
凍存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基礎培養(yǎng)液
細胞質檢情況:不含細菌、真菌、支原體等微生物污染
傳代建議:1:2~1:3傳代,2~3天換液1次
特別提醒:簽收細胞后,如細胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當天盡快聯(lián)系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請務必重視。
懸浮細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室
2.擰松瓶蓋,細胞瓶豎立培養(yǎng)8h(或過夜)
3.待細胞沉底后吸除上層液體(含碎片殘渣,請小心操作),然后吸取沉底的細胞層(2ML左右轉移到新的培養(yǎng)瓶,加入新鮮的*培養(yǎng)基(如細胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%)繼續(xù)培養(yǎng)
懸浮細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.將培養(yǎng)瓶/皿中的細胞重懸混勻
2.吸取2/3或者一半混勻后的細胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿
3.分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,使細胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細胞密度,定期半量換液(每周2-3次),待細胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重復1項操作或者凍存
NR8383大鼠肺泡巨噬細胞
購買細胞注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,細胞了解細胞相關信息如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通交流
接受后處理
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。