NOZ人膽囊癌細(xì)胞
培養(yǎng)條件:89%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
凍存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液
細(xì)胞質(zhì)檢情況:不含細(xì)菌、真菌、支原體等微生物污染
傳代建議:1:2~1:3傳代,2~3天換液1次
特別提醒:簽收細(xì)胞后,如細(xì)胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系,以便處理。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請(qǐng)務(wù)必重視。
懸浮細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室
2.擰松瓶蓋,細(xì)胞瓶豎立培養(yǎng)8h(或過(guò)夜)
3.待細(xì)胞沉底后吸除上層液體(含碎片殘?jiān)?,?qǐng)小心操作),然后吸取沉底的細(xì)胞層(2ML左右轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶,加入新鮮的*培養(yǎng)基(如細(xì)胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%)繼續(xù)培養(yǎng)
懸浮細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1.將培養(yǎng)瓶/皿中的細(xì)胞重懸混勻
2.吸取2/3或者一半混勻后的細(xì)胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿
3.分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,使細(xì)胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細(xì)胞密度,定期半量換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存
NOZ人膽囊癌細(xì)胞
購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),細(xì)胞了解細(xì)胞相關(guān)信息如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流
接受后處理
1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液 ,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5) 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。