L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤細胞
細胞生長:懸浮
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞數(shù)量:1×106個
細胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代
細胞純度:92.2%
細胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
細胞凍存:液氮凍存(*培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細胞運輸:干冰運輸(1 Vial)或活細胞運輸(T-25 flasks)
細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
L-540 Hodgkin【人霍奇金淋巴瘤細胞】培養(yǎng)條件
1640,90%;**胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
傳代方法
顯微鏡下觀察細胞,當(dāng)覆蓋80%底面積時,進行細胞傳代。注意不要等到細胞覆蓋100%的時候才傳代,那樣細胞容易老化。在生物安全柜或者超凈臺中,將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細胞,加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后,轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,按照1:3的比例進行細胞傳代培養(yǎng)。
傳代密度均勻,有以下幾點比較重要:
1.盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。我見過有些剛進實驗室的師弟師妹,一上來就加1-2ml胰酶,結(jié)果細胞團大片脫落,雖然有后續(xù)吹打步驟,但我覺得效果不佳。至于難消化的細胞,怎么掌握分寸,還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。
2.在以上基礎(chǔ)上,我覺得細胞吹勻,這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細胞至離心管,加入培養(yǎng)液重懸混勻,吸管緩慢吹打20-30次,可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會有講究,如6孔板中你*終加入2ml細胞懸液,尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿,液體表面有張力,細胞易于聚集在中間,所以我一般6孔板再加1ml以消除影響,吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。
傳代方法:1:3-1:8傳代,每周換液2次。
細胞簡稱:COLO 205(COLO205)細胞
細胞名稱:COLO 205(COLO205);人結(jié)腸癌細胞
組織來源:結(jié)直腸腺癌,腹水轉(zhuǎn)移
規(guī) 格:T25培養(yǎng)瓶,1×106cells
形態(tài)特征:貼壁/懸浮混合;上皮細胞樣
生長特性:貼壁/懸浮混合
培養(yǎng)條件:RPMI-1640+10% FBS
傳代方法:1:3-1:8傳代,每周換液2次。
背景:該細胞系是1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的,該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4-6周,角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
細胞簡稱:MRC-5(MRC5)細胞
細胞名稱:MRC-5(MRC5);人胚肺細胞
組織來源:肺
規(guī) 格:T25培養(yǎng)瓶,1×106cells
L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤細胞
其他熱銷產(chǎn)品:
RBL-2H3 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞株
RD 人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞株
Reh 人急性非B非T淋巴細胞白血病
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RF/6A 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞株
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RKO-AS45-1 人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞株
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ScaBER 人膀胱鱗癌 1640 10%
SCC-25 人舌癌細胞株 DMEM/F12
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SGC7901 人胃腺癌細胞株 1640 10%FBS
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SHZ-88 大鼠乳癌細胞株
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SK-MES 人肺鱗癌細胞株 DMEM
SK-MES-1 人肺鱗癌細胞株
SKMG4 人膠質(zhì)瘤細胞株
SK-N-BE(2) 人神經(jīng)母細胞瘤細胞株
SK-NEP-1 人腎母細胞瘤細胞株
SK-N-SH 人神經(jīng)母細胞瘤細胞株 1640 10%
SK-OV-3 人卵巢癌細胞株
SKRC39 人腎乳狀細胞癌細胞株
SMMC-7721 人肝癌細胞株 DMEM
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SUP-B15 人Ph+急淋白血病細胞系 IMDM