TPC-1人乳頭瘤狀甲狀腺癌細(xì)胞
細(xì)胞名稱: | TPC-1,TPC1細(xì)胞,人乳頭瘤狀甲狀腺癌細(xì)胞 |
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種屬來源: | 人 |
組織來源: | 甲狀腺 |
疾病特征: | 乳頭瘤狀甲狀腺癌 |
細(xì)胞形態(tài): | 上皮細(xì)胞樣 |
生長特性: | 貼壁生長 |
培養(yǎng)基: | DMEM培養(yǎng)基,90%;FBS,10%。 |
生長條件: | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, |
傳代方法: | 1:2至1:6,每周2次。 |
凍存條件: | 90% *培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲存 |
支原體檢測: | 陰性 |
TPC-1人乳頭瘤狀甲狀腺癌細(xì)胞
細(xì)胞處理方法:
一、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基,到50ml離心管中,剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代,如沒有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,對50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,如果細(xì)胞連片狀態(tài),棄掉上清對收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化(1ml胰酶37度),接種培養(yǎng)。
二、懸浮細(xì)胞
1、接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5、1000rpm,5min 離心,用吸管小心吸出上清,加入培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞。
6、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種,加入新鮮培養(yǎng)基,置于 37℃,5%CO2 培養(yǎng)(大部分細(xì)胞)。