RWPE-1人前列腺正常細胞
細胞英文(簡稱) | RWPE-1 |
細胞名稱 | |
背景資料 | 收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快和我們。如包裝完好,取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)是否正常,細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置2-3小時,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。 |
細胞來源 | ATCC |
代次 | P3 |
規(guī)格 | T25 |
細胞數 | 50-100萬 |
價格 | 電議 |
生物安全級別 | 2 |
組織來源 | 前列腺 |
細胞形態(tài) | 淘寶吧 |
細胞活力 | 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion) |
細胞檢測 | 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
培養(yǎng)條件 | RPMI-1640 +10% FBS;37℃,5% CO2 |
傳代方法 | 建議1:2-1:3 兩天換液一次 |
凍存條件 | *培養(yǎng)基50%+40%FBS+10%DMSO |
RWPE-1人前列腺正常細胞
貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?,加6~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的*培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存