RPMI8226人多發(fā)性骨髓瘤細胞
中文縮寫: RPMI-8226細胞
中文名稱: RPMI-8226(人多發(fā)性骨髓瘤細胞)
T25培養(yǎng)瓶發(fā)貨形式是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。背景資料: 來源于一位61歲的男性漿細胞瘤患者;可產(chǎn)生免疫球蛋白輕鏈,未檢測到重鏈。
產(chǎn)品來源: 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學建系
"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養(yǎng)PBS量是10%,如果出現(xiàn)細胞狀態(tài)不良情況,可以提高PBS量到15%,待細胞穩(wěn)定后,調(diào)回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養(yǎng),都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
RPMI8226人多發(fā)性骨髓瘤細胞
貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让福?~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存