HUT-78人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為2-3代
包裝:內(nèi)層無(wú)菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞來(lái)源:ATCC
貨期:1-2周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真或E-mail致銷(xiāo)售人員,我們將盡快為您解決。
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)問(wèn)題解答
HUT-78人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
傳代操作步驟:
一、貼壁細(xì)胞傳代
1.提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)。
2.吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞。
3.加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用。
4.胞用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡。
5.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
二、懸浮細(xì)胞傳代
1.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min。
2.棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液。
3.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)的過(guò)程中,經(jīng)常見(jiàn)到黑色的顆?;蛐『邳c(diǎn),這種情況是怎么引起的呢?該怎么避免呢?原因:
黑點(diǎn),大概有細(xì)胞本身帶的,環(huán)境有的,還有人身上帶進(jìn)細(xì)胞間的,還有就是血清和培養(yǎng)基
1、如果小黑點(diǎn)有增殖趨勢(shì),那么就有可能是污染了,需要處理;
2、如果小黑點(diǎn)沒(méi)有增殖趨勢(shì),且不影響細(xì)胞生長(zhǎng),也不影響實(shí)驗(yàn)的話,則可能
a、是“黑膠蟲(chóng)”,黑膠蟲(chóng)究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭(zhēng)議。有人認(rèn)為是從血清中來(lái)的一種原蟲(chóng),也有人認(rèn)為是細(xì)菌,或是真菌,也有人認(rèn)為是血清中的蛋白的結(jié)晶。“黑膠蟲(chóng)”可寄生于動(dòng)物細(xì)胞,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠細(xì)胞和培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)為生,并隨細(xì)胞傳代而傳代。“黑膠蟲(chóng)”與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng),開(kāi)始時(shí)對(duì)細(xì)胞并沒(méi)有什么影響,但當(dāng)黑膠蟲(chóng)的數(shù)量多到一定程度的時(shí)候, 細(xì)胞生長(zhǎng)就會(huì)受到影響直至死亡,嚴(yán)重影響了科研活動(dòng)的開(kāi)展和進(jìn)行。以前(這個(gè)至少是10年以前),很多實(shí)驗(yàn)室在養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用國(guó)產(chǎn)血清,那時(shí)的血清可能質(zhì)量不過(guò)關(guān),有所謂的“黑膠蟲(chóng)”,但是也沒(méi)有明確的鑒定。但是現(xiàn)在的血清,即使國(guó)產(chǎn)的,產(chǎn)品里這種現(xiàn)象就少見(jiàn)了。
b、是細(xì)胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗運(yùn)動(dòng)。
c、是核糖體,也可能是雜質(zhì)ZYC3153 人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-NEP-1 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3154 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 786-O [786-0] 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3155 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Caki-1 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3156 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 ACHN 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3157 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-A 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3158 人絨毛膜癌細(xì)胞 JEG-3 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3159 人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞 EA.ZY926 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3160 人膀胱癌細(xì)胞 5637 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3161 人輸尿管上皮永生化細(xì)胞 SV-HUC-1 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3162 人滑膜肉瘤細(xì)胞 SW 982 [SW-982, SW982] 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3163 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 T24 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3164 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 HuT 78 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3165 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 COLO 320DM 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS