HK-2人腎近曲小管上皮細胞
屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導(dǎo)入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細胞Psi-2;Psi-2細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,zui后將PA317細胞產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示,HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實,HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。
種屬:人
年齡(性別):男;16歲
組織來源:外周血;B淋巴母細胞;Burkitt's淋巴瘤
生長特性:懸浮
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
生長培養(yǎng)基
RPMI-1640(貨號:PM150110)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
說明
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點:細胞代數(shù)為4代以內(nèi)包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;
說明書細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決!上海雅吉生物與您攜手共進!以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時或郵件。需要特別指出的是:如細胞出現(xiàn)問題,請于48h內(nèi)及時反饋,本公司將竭誠為您服務(wù)!
HK-2人腎近曲小管上皮細胞
一.貼壁細胞 客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。 Hela人宮頸癌細胞
二.懸浮細胞
1. 接收到,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
三.一毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細胞。
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)
2. 嚴格無菌操作,用吸管吸出管中細胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。
4.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO7 培養(yǎng)。