C6大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

細(xì)胞名稱：大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞；C6
組織來(lái)源：膠質(zhì)瘤細(xì)胞
形態(tài)：貼壁；成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞來(lái)源：：由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導(dǎo)的大鼠膠質(zhì)瘤克隆，并經(jīng)過(guò)一系列的體外培養(yǎng)和動(dòng)物傳代交替后建成的。該細(xì)胞表達(dá)S-100；產(chǎn)生生長(zhǎng)激素；糖皮質(zhì)激素作用下可以產(chǎn)生磷酸甘油脫氫酶。當(dāng)細(xì)胞從低密度生長(zhǎng)到滿瓶時(shí)，S-100產(chǎn)量增加10倍。
我們有細(xì)胞庫(kù)和專業(yè)實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作，同時(shí)接受客戶復(fù)蘇、委托培養(yǎng)服務(wù)，并提供的科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。購(gòu)買我司細(xì)胞的客戶請(qǐng)先與公司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的細(xì)胞株名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞株說(shuō)明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
對(duì)于培養(yǎng)，只要我們細(xì)心操作，注意細(xì)節(jié)，并不是大家說(shuō)的那樣困難。對(duì)于有經(jīng)驗(yàn)和有條件的客戶，我們提供專人指導(dǎo)。對(duì)于無(wú)培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)和條件的客戶，建議由公司代為培養(yǎng)細(xì)胞及進(jìn)行后續(xù)研究。我司對(duì)每一位客戶追蹤服務(wù)，因材施教，對(duì)產(chǎn)品不僅售前負(fù)責(zé)，售后更負(fù)責(zé)。

C6大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

1)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決；2)細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決；3)對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的貼壁細(xì)胞：可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來(lái)保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)速度；4)對(duì)于生長(zhǎng)不均的貼壁細(xì)胞：在培養(yǎng)過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長(zhǎng)，而旁邊則為一塊空白)，此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無(wú)菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過(guò)換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來(lái)實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
細(xì)胞凍存的步驟：1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘)；2)去上清液，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基，于4℃預(yù)冷15分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為5×106～1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇；3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中，每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-80℃冰箱過(guò)夜。；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐；5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。