U226細胞，人多發(fā)性骨髓瘤細胞

 產(chǎn)品名稱：U226

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

組織來源：骨髓

傳代情況：C5 

細胞數(shù)量：1~3*10⁶細胞/25cm2培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)條件：RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS　

生長條件： 95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長狀態(tài)：懸浮生長

特征特性：可產(chǎn)生免疫球蛋白輕鏈，未檢測到重鏈

存儲條件：50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

1． 細胞資源中心為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療，不能直接或間接用于商業(yè)行為。 2. 細胞資源中心承諾盡最大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于當(dāng)時的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。 3. 從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。 4. 使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害

U226細胞，人多發(fā)性骨髓瘤細胞

對于貼壁細胞，若細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，換成新鮮的培養(yǎng)基；如細胞還不貼壁，將細胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中，原培養(yǎng)瓶加部分新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。對于懸浮細胞：收到細胞后，將細胞全部離心，去掉舊的培養(yǎng)基，換成新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸，建議添加雙抗培養(yǎng)）

（1）貼壁細胞收到當(dāng)天有少量或沒有飄忽的細胞可以當(dāng)天換液，因為路途顛簸造成大量飄忽的情況時，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)

（2）收到細胞后請盡快更換為含10%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清，（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）

（3）如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系SUER技術(shù)人員

細胞接收后的操作流程與注意事項：

1）貼壁細胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度（最高不能超過20%），或可根據(jù)該細胞生長特性生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

2）如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決

3）生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）

（1）吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）

（2）注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存

（3）取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

（4）鏡下觀察消化情況，在HS505.T人淋巴結(jié)成纖維樣細胞生長特性邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?，加6-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。